Nā pilikia a me nā hoʻonā o ka lōʻihi peptide synthesis

I ka noiʻi olaola, hoʻohana mau ʻia nā polypeptides me kahi kaʻina lōʻihi.No nā peptides me nā ʻakika amino ʻoi aku ma mua o 60 ma ke kaʻina, hoʻohana maʻamau ka ʻōlelo gene a me SDS-PAGE e kiʻi iā lākou.Eia naʻe, lōʻihi ka lōʻihi o kēia ʻano a ʻaʻole maikaʻi ka hopena hoʻokaʻawale huahana hope.

Nā pilikia a me nā hoʻonā no ka lōʻihi peptide synthesis

I ka synthesis o nā peptides lōʻihi, ke kū mau nei mākou i kahi pilikia, ʻo ia hoʻi, piʻi ka steric hindrance o ka hopena condensation me ka piʻi ʻana o ke kaʻina i ka synthesis, a pono e hoʻoponopono ʻia ka manawa pane e hoʻopau i ka hopena.Eia naʻe, ʻoi aku ka lōʻihi o ka manawa pane, ʻoi aku ka nui o nā hopena ʻaoʻao, a ua hoʻokumu ʻia kahi ʻāpana o ka peptide target.ʻO ia mau koena - nā kaulahao peptide hemahema he mau mea haumia nui i hana ʻia i ka synthesis peptide lōʻihi.No laila, i ka synthesis o ka peptide lōʻihi, ʻo ka pilikia koʻikoʻi e pono ai mākou e lanakila, ʻo ia ka ʻimi ʻana i nā kūlana kiʻekiʻe kiʻekiʻe a me nā ʻano hopena, i mea e hoʻonui ai i ka hopena condensation amino acid.Eia kekahi, e ho'ēmi i ka manawa pane, no ka mea, ʻoi aku ka lōʻihi o ka manawa pane, ʻoi aku ka nui o nā ʻaoʻao hiki ʻole ke kāohi, ʻoi aku ka paʻakikī o nā huahana.No laila, ua hōʻuluʻulu ʻia nā manaʻo ʻekolu.

Hiki ke hoʻohana ʻia ka microwave synthesis: No kekahi mau ʻakika amino i ʻike ʻia ma ke kaʻina hana synthesis ʻaʻole maʻalahi ke hoʻohui ʻia, hiki ke hoʻohana ʻia ka microwave synthesis.He mau hopena kupaianaha kēia ʻano, a hoʻemi nui i ka manawa pane, a hoʻemi i ka hoʻokumu ʻana o ʻelua mau huahana kī.

Hiki ke hoʻohana ʻia ke ʻano hana fragment synthesis: Ke paʻakikī kekahi mau peptides e hoʻohui ʻia e nā ʻano synthesis maʻamau a ʻaʻole maʻalahi e hoʻomaʻemaʻe ʻia, hiki iā mākou ke ʻae i ka condensation holoʻokoʻa o kekahi mau amino acids i kekahi ʻāpana o ka peptide i ke kaulahao peptide holoʻokoʻa.Hiki i kēia ala ke hoʻoponopono i nā pilikia he nui i ka synthesis.

Hiki ke hoʻohana i ka synthesis Acylhydrazide: ʻO ka acylhydrazide synthesis o nā peptides kahi ala o ka synthesis solid-phase o N-terminal Cys peptide a me C-terminal polypeptide hydrazide chemical selective reaction ma waena o ka hoʻokumu ʻana i nā paʻa amide e hoʻokō ai i ke ʻano hoʻopaʻa peptide.Ma muli o ke kūlana o Cys i ke kaulahao peptide, hoʻokaʻawale kēia ʻano i ke kaulahao peptide holoʻokoʻa i nā kaʻina he nui a synthesize iā lākou.ʻO ka mea hope loa, loaʻa ka peptide target ma o ka hopena condensation wai.ʻAʻole kēia ʻano hana e hōʻemi nui i ka manawa synthesis o ka peptide lōʻihi, akā hoʻonui nui hoʻi i ka maʻemaʻe o ka huahana hope.

Hoʻomaʻemaʻe peptide lōʻihi

ʻO ke ʻano o nā peptides lōʻihi e alakaʻi i nā ʻāpana paʻakikī o nā peptides crude.No laila, he mea paʻakikī hoʻi e hoʻomaʻemaʻe i nā peptides lōʻihi e HPLC.ʻO ka hana amyloid o ka hoʻomaʻemaʻe polypeptide kaʻina hana, hoʻomaʻemaʻe i ka nui o ka ʻike a hoʻohana maikaʻi ʻia i ka hoʻomaʻemaʻe ʻana i ka peptide lōʻihi.Ma ka hoʻohana ʻana i nā mea hana hou, ka hui ʻana o nā ʻōnaehana hoʻomaʻemaʻe he nui, ka hoʻokaʻawale pinepine ʻana a me nā ʻano ʻike ʻē aʻe, ua hoʻomaikaʻi nui ʻia ka holomua o ka hoʻomaʻemaʻe peptide lōʻihi.